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Culture embryonnaire jusqu'au stade de blastocyste
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Qu'est-ce que la culture embryonnaire jusqu'au stade de blastocyste ?
Un blastocyste est un embryon ayant atteint 5 ou 6 jours de développement. Il possède une structure cellulaire complexe composée d’environ 200 cellules. Le stade de blastocyste correspond à la phase de développement précédant l’implantation de l’embryon dans l’utérus.
La culture embryonnaire prolongée consiste à maintenir les embryons en laboratoire jusqu’au cinquième ou sixième jour de leur développement, moment où ils atteignent le stade de blastocyste. Pendant cette période, les embryons sont placés dans des conditions optimales qui favorisent leur développement.
Pour évaluer un blastocyste, on examine trois éléments principaux:
- La masse cellulaire interne : un groupe de cellules à l’intérieur de la cavité qui formera le fœtus.
- Le trophoectoderme : des cellules en contact avec l’endomètre qui deviendront le placenta et les membranes amniotiques. Ces cellules sont souvent prélevées pour des tests génétiques.
- Le blastocèle : une cavité remplie de liquide qui se forme lors de la séparation des cellules.
Le blastocyste est protégé à l’extérieur par une enveloppe appelée zone pellucide.
Lorsque l’embryon s’implante naturellement dans l’endomètre, il se trouve au stade de blastocyste. Si le développement embryonnaire a lieu dans un laboratoire de FIV, l’embryon doit être maintenu dans des conditions de culture optimales pour atteindre le stade de blastocyste, afin d’assurer une bonne qualité et permettre son implantation dans l’utérus maternel.
Types de culture
- Culture séquentielle : Les embryons sont cultivés dans deux milieux ayant des compositions chimiques différentes, adaptées aux besoins nutritionnels des embryons à chaque étape de leur développement. Ils sont cultivés dans le premier milieu depuis le stade de zygote (jour +1) jusqu’au jour +3 de développement. Ensuite, ils passent dans le deuxième milieu jusqu’à atteindre le stade de blastocyste (jour 5/6).
- Milieu global : Les embryons sont cultivés dans un seul type de milieu contenant tous les nutriments nécessaires, depuis le jour 1 de leur développement jusqu’à leur transfert ou vitrification au jour 5/6.
Classification des blastocystes
Pour prédire le potentiel d’implantation d’un blastocyste, on utilise principalement l’évaluation morphologique. Cette méthode prend en compte la masse cellulaire interne, le trophoectoderme et l’expansion du blastocèle. La classification la plus utilisée dans le monde est celle de Gardner et Schoolcraft (1999).
Selon l’expansion du blastocèle
Grade 1 ou blastocyste précoce (BP) :
Le blastocèle commence à être visible
Grade 2 ou blastocyste cavité (BC) :
Il est désormais possible de distinguer le trophoectoderme et la masse cellulaire interne
Grade 3 ou blastocyste expansé (BE) :
Le blastocèle a augmenté de taille et la couche qui le recouvre, la zone pellucide, est plus fine
Grade 4 ou blastocyste en début d’éclosion (Hatching, BHi) :
Le blastocyste commence à sortir de la zone pellucide.
Grade 5 ou blastocyste éclos (Hatched, BH) :
Le blastocyste a complètement quitté la zone pellucide.
Selon la Masse Cellulaire Interne, on prend en compte : sa taille, le degré de compaction des cellules et son apparence.
Catégorie A
De nombreuses cellules compactées
Catégorie B
De nombreuses cellules non compactées
Catégorie C
Peu de cellules
Catégorie D
Cellules présentant des signes de dégénérescence
Selon le trophoectoderme
Catégorie A
Homogène, cohésif et composé de nombreuses cellules
Catégorie B
Homogène, mais avec moins de cellules
Catégorie C
Peu de cellules
Catégorie D
Cellules présentant des signes de dégénérescence
Les meilleurs taux de gestation sont obtenus en transférant des blastocystes de qualité 4AA ou supérieure.
À morphologie égale entre les blastocystes, d’autres critères morphologiques peuvent être pris en compte pour choisir lequel transférer, tels que l’épaisseur de leur couche externe (zone pellucide), la présence de signes d’éclosion ou la qualité embryonnaire aux stades précédents.
Avantages d’une culture au stade de blastocyste
Meilleurs taux d’implantation: Les blastocystes ont un potentiel d’implantation plus élevé, car ils sont plus avancés dans leur développement
Sélection naturelle: Les embryons qui atteignent le stade de blastocyste sont souvent de meilleure qualité, ce qui permet une meilleure sélection
Compatibilité avec l’utérus: Le transfert au stade de blastocyste est mieux synchronisé avec le moment où l’utérus est prêt à recevoir l’embryon
Réduction des anomalies chromosomiques: En raison d’une meilleure sélection des embryons, les blastocystes présentent un pourcentage plus faible d’anomalies chromosomiques ou d’aneuploïdies.
Réduction du risque de grossesses multiples: En transférant un seul blastocyste de haute qualité, on diminue le risque de grossesses multiples tout en maintenant de bonnes chances de succès
Biopsie embryonnaire au stade de blastocyste: La biopsie embryonnaire dans les cycles de PGT-A doit être réalisée au stade de blastocyste. Cela permet de prélever un nombre suffisant de cellules sans compromettre la viabilité de l’embryon, tout en obtenant des résultats beaucoup plus concluants.
Taux de grossesse avec les blastocystes
Aujourd’hui, l’amélioration des conditions de culture in vitro grâce à des milieux plus spécifiques a permis de prolonger la culture jusqu’au stade de blastocyste, atteignant des taux de développement de 40 % à 60 % de la cohorte embryonnaire. Les embryologistes évaluent les blastocystes en fonction de la morphologie de leurs cellules et de leur degré d’expansion. Les blastocystes de grande qualité peuvent atteindre un taux de grossesse de 60 % avec le transfert d’un seul embryon.
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